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NE-PER NUCLEAR Invitrogen現貨
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NE-PER NUCLEAR Invitrogen現貨
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描述
Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒提供了高效的細胞裂解和抽提方法,可在兩個小時之內完成胞漿蛋白與核蛋白的分離操作。
NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒的特性:
• 快速—在兩個小時之內獲得胞核與胞漿內的可溶性蛋白組分
• 可靠—NE-PER試劑盒已經被950篇以上的發表文獻引用
• 通用 –適用于培養細胞或組織(僅適用于新鮮樣本)的核蛋白抽提
• 可擴展—兩種規格試劑盒,滿足從細胞和組織中抽提樣本的應用需求
• 方便—操作簡單,無需超速梯度離心
• 兼容性好—獲得樣本適合于多種下游應用,包括免疫印跡、凝膠遷移分析、蛋白分析、報告基因分析以及酶活性分析
NE-PER試劑盒為用戶提供了高效的核蛋白抽提方法,用戶只需擁有臺式微量離心機、離心管和移液器,進行簡單的分步式細胞裂解及核蛋白與胞漿蛋白離心分離即可。NE-PER試劑盒能夠高效地將胞漿蛋白與核蛋白溶解和分離為不同組分,交叉污染以及基因組DNA/mRNA的干擾均降到了zui低。一旦經過脫鹽或稀釋,分離后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用實驗,如遷移率分析(EMSA)、免疫共沉淀(Co-IP)和拉下實驗。
分離胞核和制備核蛋白抽提物的方法很多,但大多數制備核蛋白抽提物的制備方法都很耗時,并需要機械勻漿、凍融循環、反復離心或透析,而這些都可能影響核蛋白的完整性。NE-PER 核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒使用了基于試劑的分離方案,能夠分步裂解細胞并從胞漿中分離出完整的細胞核,然后再從基因組DNA與mRNA中抽提核蛋白。這一溫和的過程可在兩小時之內完成,且使用培養細胞時僅需標準的桌臺式離心機即可。此外,用戶還可以從細胞培養物或組織樣本中分離得到具有活性的核蛋白與胞漿蛋白。
本試劑盒能夠從兩百萬個細胞中提出200至500µg胞漿蛋白和100至200µg的核蛋白(濃度為1mg/mL)。一般情況下,胞漿蛋白與核蛋白之間的交叉污染在10%左右。本方法分離得到的主要是細胞核中的可溶蛋白,而非與染色質結合的蛋白或核膜整聯蛋白。可通過調整核抽提試劑(NER)的體積來改變胞核抽提物的蛋白濃度,而不會對抽提效率造成顯著影響。從細胞中專一地抽提核蛋白是許多基因調控研究的關鍵,然而現有的許多分離細胞核、制備核蛋白抽提物的方法都十分耗時,且需要進行機械勻漿、凍融循環、重復離心或透析等操作,對許多脆弱的核蛋白的完整性造成影響。NE-PER試劑盒能夠克服這些問題,通過EMSA及其他分析技術為用戶提供高質量的濃縮核蛋白抽提物。
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