U-ProteinExpress蛋白純化原則

蛋白純化要利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異，利用各種蛋白間的相似性來(lái)除去非蛋白物質(zhì)的污染，而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來(lái)。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學(xué)活性都會(huì)有差異，利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來(lái)得到重組蛋白。

U-ProteinExpress重組抗體使制備人源化抗體和人源抗體成為可能，而這是其他常規(guī)的多克隆或單克隆抗體制備方法所不可能做到的。主要包括四個(gè)方面的技術(shù)：抗體庫(kù)技術(shù)，包括組合抗體庫(kù)、噬菌體抗體庫(kù)、細(xì)菌和酵母展示的抗體庫(kù)、核糖體展示的抗體庫(kù)及其抗體庫(kù)的篩選技術(shù)；重組抗體基因的改造和表達(dá)，包括抗體親和力成熟、抗體人源化改造和穩(wěn)定性改造，以及抗體基因在原核、酵母、昆蟲(chóng)、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、植物及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中的表達(dá)；重組抗體效應(yīng)功能的提高，涉及抗體與同位素、藥物、毒素結(jié)合的"導(dǎo)向藥物"、雙特異性抗體、抗體一酶融合蛋白、免疫細(xì)胞因子及細(xì)胞內(nèi)抗體；抗體特異性分析和鑒定，主要介紹抗體的分離和純化、抗體標(biāo)記技術(shù)、抗體親和力測(cè)定、抗體的抗原表位分析、抗體基因測(cè)序和結(jié)構(gòu)模建，以及常用的抗體鑒定技術(shù)，如ELISA、免疫組化、FACS分析、免疫沉淀和Westernblot等。