Qubit熒光計配套檢測試劑盒如何挑選？

蘇州螞蟻淘生物科技有限公司代理銷售賽默飛invitrogen公司的Qubit熒光計配套檢測試劑盒。

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該類試劑盒分型很多，許多客戶不知道如何挑選，現整理如下：

靈敏的靶向特異性定量試劑

Invitrogen qubit檢測試劑運用簡易的混合-讀數形式，可使用qubit熒光定量儀進行讀數，僅需低至2分鐘的孵育時間。 qubit檢測試劑盒中使用的染料僅會在與靶向分子發生特異性結合時發出熒光，從而小化污染物（包括降解DNA或RNA）對結果的影響。

qubit檢測試劑盒

qubit檢測試劑盒提供了濃縮的檢測試劑、稀釋緩沖液和預稀釋的標準品。 只需簡單地使用已提供的緩沖液對試劑進行稀釋，加入您的樣品（從1 μL至20 μL的任意體積均可），然后就可使用Invitrogen qubit 4型熒光定量儀讀取濃度值（圖1）。 該檢測在室溫下即可進行，信號可保持3小時穩定。

所有的qubit檢測均依照相同的常規操作流程進行，運用簡易的混合-讀取形式，對于DNA和RNA檢測僅需2分鐘的孵育時間，對于蛋白質檢測需要孵育15分鐘。 qubit 4型熒光定量儀自帶可支持多達1000例樣品數據的存儲容量，您也可以使用USB數據線或USB移動存儲設備來轉移數據。

除了用于dsDNA、寡核苷酸、總RNA、microRNA、蛋白質的核心檢測試劑外，也可使用Ion Sphere質控試劑盒，在使用Ion Personal Genome Machine（PGM）測序儀進行測序前，通過qubit 4型熒光定量儀對Ion Sphere的微粒質量進行評估。



圖 1. qubit定量檢測流程。 結合qubit 4型熒光定量儀使用時，Invitrogen qubit定量檢測試劑盒擁有無縫的工作流程，可輕松完成數據收集。 qubit檢測試劑盒提供了濃縮的檢測試劑、稀釋緩沖液和預稀釋的標準品。 只需簡單地使用已提供的緩沖液對試劑進行稀釋，加入您的樣品（從1 μL至20 μL的任意體積均可），然后就可使用qubit 4型熒光定量儀讀取濃度值。 該檢測在室溫下即可進行，信號可保持3小時穩定。

敬請注意： 除microRNA及Myqubit檢測試劑盒外，所有的qubit檢測試劑盒均可用于Invitrogen qubit 3.0及2.0款熒光定量儀，以及初的Invitrogen qubit（1.0）熒光定量儀。microRNA及Myqubit檢測試劑盒僅適用于qubit 4、3.0及2.0型熒光定量儀，而RNA IQ檢測試劑盒僅適用于qubit 4型熒光定量儀。

您是否需要更高通量的定量方法？

當您需要定量1-20個樣品時，qubit檢測試劑是非常合適的（使用qubit 4型熒光定量儀進行讀數）。
而對于20-2000+例樣品，您可使用用于使用微孔平板進行核酸定量或蛋白質定量的Invitrogen Quant-iT檢測試劑盒和試劑。

            根據靶向分子選擇qubit檢測試劑盒

1、dsDNA

Invitrogen qubit dsDNA BR（寬檢出范圍）試劑盒和HS（高靈敏度）試劑盒經專門設計，可輕松進行的DNA定量。 相比RNA，這些試劑盒對于雙鏈DNA（dsDNA）有著高度選擇性。 該檢測試劑盒對于常見污染，如鹽、自由核苷酸、溶劑、變性劑或蛋白質等，有著很好的適應性。

為了測定樣品純度，您可以配合使用Invitrogen qubit dsDNA檢測試劑盒和qubit RNA檢測試劑盒。 這些檢測方法相比A₂₆₀/A₂₈₀檢測方法可以為您更好地指示樣品純度。 要檢測核酸樣品中的蛋白污染，只需簡單地將1至20 μL樣品加入至Invitrogen qubit蛋白檢測試劑中即可。

產品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	研究應用
qubit dsDNA BR檢測試劑盒	Q32850	100	2-1,000 ng	基因組DNA和少量純化DNA樣品的定量
	Q32853	500
qubit 1x dsDNA HS檢測試劑盒	Q33230	100	0.2-100 ng	PCR產物、病毒DNA或NGS樣品的定量
	Q33231	500
qubit dsDNA HS分析試劑盒	Q32851	100	0.2-100 ng	量化PCR產物，病毒DNA或NGS樣品
	q32854	500

 

2、總RNA

qubit RNA iQ檢測試劑可對RNA完整度和質量進行高度和靈敏的測定，可用于如二代測序和RNA測序等重要應用。  準確了解有多少可用RNA和降解RNA現在可以非常簡單快速，只需花費5分鐘進行混合和讀數即可得到結果。 Invitrogen qubit RNA XR（擴展范圍）試劑盒和HS（高靈敏度）試劑盒可輕松進行的RNA定量。 相比雙鏈DNA（dsDNA），這些試劑盒對于RNA有著高度選擇性，其中BR檢測試劑可完成樣品原始濃度在1 ng/μL至1 μg/μL內的測定，檢測范圍為20–1000 ng，而HS檢測試劑則可用于樣品原始濃度在250 pg/μL至100 ng/μL內，檢測范圍為5–100 ng的測定。 該檢測試劑盒對于常見污染，如鹽、自由核苷酸、溶劑、變性劑或蛋白質等，有著很好的適應性。

為了測定樣品純度，您可以配合使用qubit dsDNA檢測試劑盒和qubit RNA檢測試劑盒。 這些檢測方法相比A₂₆₀/A₂₈₀檢測方法可以為您更好的指示樣品純度。 要檢測核酸樣品中的蛋白污染，只需簡單地將1至20 μL樣品加入至qubit蛋白檢測試劑中即可。

產品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	研究應用
qubit RNA IQ檢測試劑盒	Q33221	75	N/A	評估用于測序、微陣列檢測和RT-PCR的RNA質量
	Q33222	275
qubit RNA XR檢測試劑盒	Q33223	100	20 ng–8 µg	對RNA測序，微陣列，RT-PCR和qRT-PCR進行定量分析
	Q33224	500
qubit RNA BR檢測試劑盒	Q10210	100	20-1,000 ng	對測序、微陣列檢測、RT-PCR和northern雜交的樣品進行定量
	Q10211	500
qubit RNA HS檢測試劑盒	Q32852	100	5-100 ng
	Q32855	500

 

3、microRNA

Invitrogen qubit microRNA檢測試劑盒設計用于對如microRNA等小RNA（17–25 nt或bp）進行簡易的定量，即使存在如鹽、自由核苷酸、溶劑、去污劑或蛋白質等常規污染等也可完成測定。 相比rRNA或較大的mRNA (>1,000 bp)，該檢測試劑對于小RNA有高度選擇性。 我們可以對樣品管中低至0.5 ng水平的純化樣品中的小RNA進行高重復性的定量（按照已提供的用戶手冊中的實驗流程進行）。 這款檢測試劑可檢測所有類型的小RNA，包括microRNA和siRNA，單鏈或雙鏈均可。 該檢測試劑在核心檢測范圍內的動態檢測范圍為5 ng/mL至500 ng/mL (1–500 ng) ，而在擴展檢測范圍內可檢測低至2.5 ng/mL (0.5 ng) 的樣品。 該檢測試劑可完成樣品原始濃度在0.05 ng/μL至100 ng/μL內的測定。

• 請閱讀BioProbes 70文章 - 傳統和高通量測定法的基于熒光的小RNA定量

產品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	研究應用
qubit microRNA檢測試劑盒	Q32880	100	1-100 ng	對微陣列檢測、qRT-PCR和測序的樣品進行定量
	Q32881	500

 

4、ssDNA

Invitrogen qubit ssDNA檢測試劑盒使得DNA定量更輕松更。 該檢測試劑可完成樣品原始濃度在50 pg/μL至200 ng/μL內的測定，檢測范圍為1–200 ng。 該檢測在室溫下即可進行，信號可穩定保持30分鐘。 該檢測試劑盒對于常見污染，如鹽、自由核苷酸、溶劑、去污劑或蛋白質等，有著很好的適應性。

產品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	注
qubit ssDNA檢測試劑盒	Q10212	100	1-200 ng	可用于寡核苷酸、引物、變性DNA、PCR產物的定量

 

5、蛋白質

Invitrogen qubit蛋白質檢測試劑盒使得蛋白質定量更輕松更。 該檢測試劑可完成樣品原始濃度在12.5 μg/mL至5 mg/mL內的測定，表現出較低的蛋白質間差異。 該檢測試劑對于常見污染，如還原性試劑（DTT、β-巰基乙醇）、鹽、自由核苷酸、氨基酸、溶劑和DNA等（不包括去污劑），有著良好的適應性；對于其他污染，需要輕微修改實驗流程。

產品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	注
qubit 蛋白質檢測試劑盒	Q33211	100	0.25-5 µg	存在DTT、β-巰基乙醇、氨基酸、DNA的情況下保持
	Q33212	500